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产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
中草药DNA提取试剂盒 | Chinese herbal medicine DNA extraction kit | 20次 | CS-01F99009 |
基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA的完整性;处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA 比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题,我们公司在植物DNA提取试剂盒产品基础上开发了本产品。
产品特点: 1.适合于大多数药材。 2. 得到的DNA 纯净,OD260/280一般都在1.6以上,原液或100倍之内的稀释液一般都能直接作为PCR 模板。 3. 操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。 4. 试剂无毒无害,环保卫生。 储存条件:常温运输及保存,有效期一年。 使用方法: 1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL 加入到10-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。 2. 称取20mg左右的中草药,先剪成或研磨成微小的碎片,然后转移到预热的溶液A中匀浆,匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨后将中草药粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨,因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。 3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,然后全部转移到新的1.5mL塑料离心管中(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,植物碎片可倒入)。 4. 12000~15000g室温离心3分钟,将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中(上清液的体积一般为200-700μl,如果体积超过700μl,多余部分可以不要)。有的上清液中会有少量细小块状物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。 5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀(溶液将呈白色混浊状),然后置冰浴中5分钟。 6. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新离心管中。 7. 加入0.2mL的氯仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。 8. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。 9. 重复氯仿抽提步骤一次,此步可以有效去除含色素物质。 10. 加入0.6-1倍体积的异丙醇(自备),上下颠倒30秒混匀。 11. 12000~15000g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。 12.沉淀用75%乙醇清洗2次后,室温晾干。 |
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