产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
His标签蛋白纯化树脂(变性剂耐受型) | GoldBalb His-tag Purification Resin (Denaturant-resistant) | 10ml|100ml|10×100ml | CS-01F98963 |
本产品是一种新型的可以兼容尿素和盐酸胍等蛋白变性剂,从而不仅可以在非变性条件下也可以在变性条件下简单、快速、高效并且高特异性地纯化His标签蛋白的纯化介质。
通常带有6个组标签的重组蛋白(6×His-tagged recombinant protein)或带有6个以上连续组标签的重组蛋白,被称为His标签蛋白。蛋白样品溶液通过GoldBalb His-tag Purification Resin (变性剂耐受型)时,重组蛋白His标签上的组残基能特异性地结合到GoldBalb His-tag Purification Resin (变性剂耐受型)中的镍离子上,其它蛋白则不能被结合。洗涤后,His标签重组蛋白可在非变性条件下或者变性条件下被洗脱,从而被分离纯化。
本产品对His标签重组蛋白的亲和力、选择性高、结合容量大,使用本产品可以获得高纯度的His标签重组蛋白,可用于简单、快速、高效地纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等多种表达系统中表达的His标签重组蛋白。纯化的蛋白可以用于结构和功能研究、抗体制备、蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。 本产品采用了一种高度交联的6%琼脂糖凝胶(Sepharose CL-6B)为基质,并使用了进一步优化的接臂和镍离子螯合技术,和目前市售的同类产品相比,非特异性蛋白结合显著降低。 本产品可以耐受8M尿素或6M盐酸胍,可用于非变形条件和变性条件下His标签蛋白的纯化。DTT、-巯基乙醇等还原剂会还原螯合结合的镍离子,而EDTA/EGTA等二价离子螯合剂则会使本产品脱镍,因此在蛋白样品或者纯化过程所使用的溶液中不能含有还原剂和螯合剂。如需在还原剂如DTT/-巯基乙醇或螯合剂EDTA/EGTA存在的条件下纯化蛋白,推荐使用的耐受还原剂和螯合剂的YT616 GoldBalb His-tag Purification Resin (耐还原螯合型)。 本产品已经螯合了镍离子,呈蓝绿色,凝胶的颗粒直径为45~165μm。可耐受的大压力为0.025MPa,约合5.8psi。采用固定流速进行蛋白纯化时的推荐流速为0.5mL/min。 本产品可以高容量、高特异性地结合His标签蛋白。大蛋白结合量约为25~35mg蛋白(分子量为55kD的蛋白)/mL凝胶。实际使用时的大结合量主要取决于待纯化的His标签重组蛋白的分子量大小,分子量越大则大结合容量越大,分子量越小则大结合容量越小。但对于分子量相同的蛋白,也会因为蛋白本身特性的不同,结合的大容量也会有所不同。 本产品储存在20%乙醇中。本产品包装体积中50%为凝胶,例如10mL总体积中5mL为凝胶,5mL为液体。使用时宜把凝胶充分重悬后再吸取。 |
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