产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
DSP交联剂(不溶于水) | Dithiobis(succinimidylpropionate) | 100mg|500mg | CS-01F98867 |
DSP是不溶于水的同型双功能的N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS-酯)。DTSSP是其水溶性类似物。这些交联剂是硫醇可裂解的,与伯胺反应的并且已经用于很多应用中。NHS-酯能够与伯氨基(-NH2)有效反应形成稳定的酰胺键,释放N-羟基琥珀酰亚胺。DSP是非磺化的,因此是疏水性的,而DTSSP是磺化的和水溶性的。需要将DSP先溶解在有机溶剂中再加入到水相反应混合物中。因为DSP没有具有带电荷的基团,所有是亲脂性和可渗透膜的,能够用于细胞内和膜内蛋白质的共轭反应。DTSSP则可以直接添加到水相中,用于交联细胞表面蛋白质。
基本信息: 分子量:404.42 间隔臂:12Å 化学式:C14H16O8N2S2 保存:-20℃ 使用方法: 一、在溶液中交联蛋白的方法 所需材料 交联剂溶液:将DSP溶于无水DMSO中,10~25mM。DTSSP可溶于水,缓冲液或直接加入样品。或在pH5.0,5mM柠檬酸钠缓冲液中制备DTSSP,并逐滴加入到反应混合物中。丢弃任何未使用的重构交联剂。 反应缓冲液:磷酸盐缓冲液,HEPES,pH7~9的碳酸氢盐/碳酸盐或硼酸盐缓冲液。避免含有伯胺的缓冲液,因为胺将与交联反应竞争。 步骤: 用反应缓冲液配制蛋白质溶液。如果样品溶液含有Tris或甘,则需在反应缓冲液进行深度透析。 向蛋白质样品中加入所需的交联剂。如果蛋白质浓度大于5mg/ml,则使用10倍摩尔过量的交联剂。若样品小于5mg/ml,使用20~50倍摩尔过量的交联剂。建议使用的交联剂终浓度为0.25~5mM。 将反应混合物在室温下孵育30分钟或在冰上孵育2小时。 |
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