上海莼试生物技术有限公司
热卖产品最新促销最新推荐
分子生物学试剂 > 蛋白质研究 > HIS标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)
产品名称:
HIS标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)
型号:
CS-01F98510
生产地址
国产
产品价格
电议
产品简介
HIS标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)现货供应,价格实惠。
产品详情

一、概述:

 

产品属性: 

产品名称

英文名称

规格

货号

HIS标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)

 

5ml

CS-01F98510

本试剂盒包含Ni-Agarose 填料、亲和柱空柱以及可溶性His 融合蛋白纯化所需的全部试剂(细菌裂解液、蛋白酶抑制剂混合物、结合缓冲液和洗脱缓冲液组分),使用方便。该镍柱纯化系统对6×His-tag蛋白具有显著特异吸附能力,能够高效一步纯化带有6个组亲和标签的蛋白。该系统具有4Ni2+螯合位点,较只有3个螯合位点的Ni-IDA 结合Ni2+更为牢固,有效防止纯化过程中Ni2+脱落且增对His标签蛋白的结合能力,提高纯化效率。较高的基团密度,大大提高了蛋白载量。该系统在天然或变性条件下,对来源于各种表达系统(如杆状病毒,哺乳细胞,酵母以及细菌)中的His标签蛋白,均有很好的纯化效果。

His标签蛋白纯化试剂盒提供全套试剂,适用于从各种样品中纯化带有6×His标签的蛋白。本试剂盒填料支持物为CL-6B 琼脂糖凝胶,载量为20mg His标签蛋白/ml填料。

本产品已螯合镍离子,可直接用可溶性蛋白的纯化,使用方便,快捷。使用pH 3-13的范围内都能有好的纯化效果,pH2pH14的条件下也可以短期使用。填料可重复使用。

我公司可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒,包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒,专用于蛋白质谱检测的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。我公司还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

储存条件:蛋白酶抑制剂-20℃保存;其他2-8℃保存;避免冷冻。

有效期:一年。

使用前请仔细阅读产品说明书

使用限制:本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。

产品更新:我司会更新或升级产品,以优化和增其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照随产品附带的说明书,不要参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。

使用安全: 使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应立即用水冲洗。

试剂盒以外自备仪器和试剂耗材:

仪器:

●离心机● 振荡器● 涡旋混匀器● 移液器●冰箱●冰盒

试剂:

纯水

耗材:
●离心管● 吸头

实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀  
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。产品仅用于科研
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。

标签:HIS标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白) 5ml 

联系我们

联系人:高小姐

手    机:13585831301

Q      Q:3004967995

座    机:021-59541103

传    真:021-60443211

地    址:上海市嘉定区澄浏公路52号中科院技术转移中心24号楼