荧光蛋白上样缓冲液在电泳前的样品处理阶段对SDS-PAGE的蛋白样品进行预染，标记上荧光。实验完成以后，凝胶中或转膜后的蛋白条可直接通过紫外灯、LED灯或其他数字成像系统进行观察和分析，无需染色脱色。

使用步骤：

1. 请在使用前根据管壁标签上的体积加入resuspension buffer重悬。Resuspension buffer在4℃可能会有沉淀产生，室温下放置至沉淀消失。

2. 将用上样缓冲液处理的蛋白样品与待电泳蛋白样品1:2混合。比如，3ul上样缓冲液+6ul蛋白样品。

3. 90～100℃加热上述处理的样品混合液5分钟。细胞或组织样品，加热时间延长至10分钟。确保加热温度＞90℃使样品充分受热。

Ÿ 大部分预制胶(Bis-Tris体系除外)可以直接进行下一步。Bis-Tris体系的预制胶(如Life Technology)，需加入20%已处理样品体积的Enhancing buffer。比如，10ul已处理的样品需加入2ul Enhancing buffer。

4. 样品可以上样进行电泳了(无需再加Loading Buffer处理)。

5. 电泳结束后，将凝胶放至透射仪上进行观察和拍照。透射仪可以是紫外灯，蓝光LED灯或其它凝胶成像系统。如果光源在可见光波长范畴的无需剥胶，因为可见波长范围内的光可以穿透玻璃或塑料材质的胶板。

6. (可选的)如果有需要，经荧光蛋白上样缓冲液处理的凝胶仍可进行考染。按标准的考染步骤进行即可。

注意事项：

1. 请勿使用该上样缓冲液处理预染的或预处理的蛋白分子量标准。这些产品与荧光蛋白上样缓冲液不兼容。

2. 灵敏度影响因素：高pH(大于7)不会影响染色，低pH则会降低染色的效率，如果样品的pH低于5，建议将pH调整至7以上。

3. 荧光蛋白上样缓冲液不适合在如下SDS-PAGE实验中使用：切割蛋白条带用以测序、质谱分析或抗体制备。

4. 建议-20保存，如果室温放置2-3周，则可添加新的DTT，蛋白条带会重新变得清晰和明亮。添加DTT的终浓度不要过20mM。也可以添加其他还原剂TCEP(2 mM)，效果也很好。
储存条件：-20℃