操作步骤：

根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，佳胶浓度请参考附表1。

I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)

1、参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。

2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。

3、加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可)， 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层，使凝胶表面保持平整。

5、静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。

II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)

1、去除覆盖在分离胶上的水层。

2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。

3、加入10%过硫酸铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。

5、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。

6、静置10~20分钟，等待浓缩胶聚合。

7、待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。

8、进行常规电泳操作。
储存条件：2～8℃