产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
pET-Dual-N-GST-PreScission质粒 | pET-Dual-N-GST-PreScission Plasmid | 1μg|100μg | CS-01F97822 |
pET-Dual-N-GST-PreScission是一种用于在大肠杆菌中高效共表达两种目的蛋白的质粒,其中一种可以带上GST标签(Glutathione S-transferase tag,GST tag)并且GST标签后有PreScission蛋白酶的酶切位点。本质粒包含两个多克隆位点(MCS),每个多克隆位点前都有一个T7启动子/lac操作子和一个核糖体结合位点(rbs),因此都可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白的表达。本质粒为氨苄青抗性。
在共表达两个蛋白的复合物时,通常宜把较难表达的基因克隆到个多克隆位点,宜把较易表达的基因克隆到个多克隆位点。这样通过GST柱纯化,可分离纯化获得带有GST标签的蛋白复合物。本质粒的N端GST标签与个多克隆位点之间有PreScission蛋白酶识别的八肽序列LEVLFQGP,对应核酸序列为CTGGAAGTTCTGTTCCAGGGGCCC,配合使用我司生产的PreScission Protease4℃酶切过夜,天收集穿柱液即可获得蛋白复合物,这为后续进行蛋白复合物的功能检测、蛋白结晶等工作带来了极大的便利。PreScission蛋白酶酶切发生在八肽序列的Q和G之间,因此在酶切去除GST标签的时候会在目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GP。当然,本质粒也可以只在个多克隆位点插入目的基因,这样就会仅表达一个含有N端GST标签和PreScission识别位点的目的蛋白。 使用说明: 1.使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。 2.100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。 |
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