此系统采用NMY51酵母菌株，可直接转化质粒进行蛋白互作验证或筛库试验；此菌株Transformation marker为：trp1，leu2-3，报告基因为：HIS3，ADE2和lacZ，步通过营养缺陷型报告基因(HIS3，ADE2)进行选择性生长筛选，进一步通过LacZ报告基因进行β-半乳糖分析显色的定量或半定量筛选，三个独立的报告基因，受不同启动子的调控，降低假阳性几率。

原理：泛素(ubiquitin)分子量很小，由76aa 残基组成；泛素作为降解信号分子，可以连接另外一种蛋白质的N端，然后被泛素专一性蛋白酶(UBPs)识别，从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。

泛素可以人为分成两部分：N端(Nub)，C端(Cub)。先，人为地将泛素Nub的3位异亮突变为甘(NubI突变为NubG)。这样与Cub的亲合力大大降低，避免了Cub和Nub自我结合或接近的可能性。其次，将Cub部分与人工合成的LexA-VP16转录激活因子融合成一个融合蛋白Cub-LexA-VP16。

正常条件下NubG不与Cub结合，UBPs也不能识别分离的泛素，转录激活因子也不会被切下来。后，将要检测的蛋白质分别与NubG和Cub融合，形成bait融合蛋(bait-cub-LexA-VP16)和prey融合蛋白(prey-NubG)。

如果bait和prey发生相互作用，就会促使NubG和Cub的相互接近，被 UBPs识别，导致LexA-VP16的解离，进入核内，从而激活报告基因的转录。

注意事项：

1.感受态细胞好在冰上融化。

2.转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。

3.同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。

4.NMY51酵母菌株对高温敏感，适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
5　酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆，涂SD双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆。