产品组成：

组分 规格

RTS BL21(DE3) Competent Cell 10支

Nano E.coli Transfection Reagent 600μl

保存条件：-20℃可保存半年，-70度可保存2年；可室温运输。

使用方法：

1．从-20℃冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化，放置于冰上。

注意：该试剂含长链带电化合物，允许反复冻融20次，使用完毕后继续-20℃保存。

2．取50μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2ml EP管中，加入1～20ng质粒DNA（不可使用连接产物），枪头吹打混合均匀，冰上放置2～5分钟。

注意：放置时间不要过30分钟，过长时间会导致核酸聚合，从而影响转化效价。

3．将上述混合物（50μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA）加入到一支RTS BL21(DE3)感受态细胞干粉中，枪头轻轻吹打，彻底溶解细胞干粉，置于冰上15分钟。

注意：使用RTS BL21(DE3)感受态细胞干粉前，轻甩干粉至管底部，如果发现干粉已经溶解则不可使用。

4．置于42℃热激1分钟后，迅速置于冰上急冷2分钟。

5．向热激完毕的感受态细胞中，加入450μl不含抗生素的SOC培养基(或LB培养基)，37℃振荡（225 rpm）培养60分钟。使质粒上抗性标记基因表达，菌体复苏。

6．取200μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。

7．将平板置于37℃培养，12～18小时后可出现菌落。
8．获得的表达菌，可使用IPTG进行诱导表达，从而获得重组蛋白。