基因型：

F-mcrB mrr hsdS20(rB-，mB-)recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR)xyl-5λ-leu mtl-1 endA1+

操作说明：

1.Stbl3感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中)，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.培养基，使用其他培养基会降低转化效率。

4.30℃，225 rpm复苏90分钟。(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control PUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟。)

5.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.培养基上。

6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。(若转化control PUC19计算转化效率，则需37℃培养过夜)

注意事项：

1.感受态细胞好在冰上融化。

2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。