产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
T4连接酶 | T4 DNA ligase | 100U | CS-01F97672 |
本T4 DNA Ligase是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化而来的,催化相邻DNA链的5’磷酸基团和3’羟基基团以磷酸二酯键结合反应。该酶可催化平末端或粘性末端DNA之间的连接,还可修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交双链中的单链切口。本品可应用于DNA插入片段和载体DNA的粘性末端和平末端的连接,以及线性DNA的自身环化。
产品组分: T4 DNA ligase (5U/μl)————————100 U (20μl) 10×T4 DNA Ligation Buffer——————0.2 ml 50%PEG Solution————————————0.15 ml 活性定义:此酶的活力单位为Weiss Unit。1个Weiss Unit相当于约200个粘性末端连接单位(cohesive-end ligation unit, CEU)。1个CEU单位定义为在20μl的连接反应体系中,在16℃30分钟内,能使50%的经HindIII消化的λDNA片段连接所需的酶量。 注意事项: 1、T4 DNA Ligase的终用量不要过推荐的用量,否则影响连接效率。 2、PEG可以极大提高平末端的连接效率,我们推荐加入终浓度为5% PEG Solution以提高平末端的连接效率。 3、为了提高转化效率,转化时建议所加入连接产物的量不要过感受态细胞体积的10%。 4、由于T4 DNA Ligase中含有甘油,比较粘稠容易挂壁,建议使用前短暂离心将液体收集到管底,取样时枪头尽量不要深入液面太深以免粘在枪头上造成损失。 |
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