产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
大肠杆菌JM109感受态细胞 | E.coli JM109 Chemical Competent Cell | 0.1mL*10 | CS-01F97552 |
介绍
本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。
产品特点: 1. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,-80℃保存几个月转化效率不发生改变。 2. recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组,提高纯化质粒的产量和质量。 3. JM109菌株基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F’traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ] 4. 本产品质量稳定,使用方便,质优价廉。 储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。 自备试剂:无菌纯水,SOB和SOC液体培养基,相关抗菌素。 使用方法: 1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。 以下实验以50μL感受态细胞为例。 2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。 3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。 4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。 5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。 注意事项: 1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。 |
联系人:高小姐
手 机:13585831301
Q Q:3004967995
座 机:021-59541103
传 真:021-60443211
地 址:上海嘉定区嘉罗公路1661