本品先采用反转录酶以RNA为模板合成 cDNA，然后再以合成的cDNA为模板，经过PCR扩增反应的热变性、引物退火、链延伸三个步骤循环往复，在短时间内扩增得到大量DNA片段，扩增得到的目的产物3’末端含有一个A碱基，可直接用于T/A克隆。

技术说明：

1、 该体系常用50℃进行反转录反应，可以在45℃~60℃范围内进行反转录温度优化;根据反应特征不同，可以在10~30分钟内对反转录时间进行优化;

2、 该体系所用的反转录酶是在MMLV基础上进行了基因改造，去除了RNaseH活性，使其具有更高的温度耐受性和反转录温度，对RNA复杂结构模板具有更高的反转录效率;

3、 该体系具有更好的体系稳定性和适用性，非常适合于病毒、组织等样本提取RNA复杂模板的检测。
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。