产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
耐热逆转录酶I | Reverse Transcriptase I | 2000U | CS-01F97210 |
本产品是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上经过多点突变得到的全新逆转录酶。本产品热稳定性提高,在50℃下活性高,且可耐受高达55℃的反应温度,适用于具有二级结构的RNA模板的逆转录,能稳定可靠地合成cDNA。该酶与模板的亲和力增,可获得更多全长的cDNA,并可检测到低至1 pg的总RNA,特别适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。此外,本品降低了逆转录过程的错配率,提高了克隆的保真度。
质量控制
核酸外切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在37 oC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37 oC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
RNase残留检测:200 U本品和1 μg小鼠总RNA在37 oC下孵育1小时,RNA电泳谱带不发生变化。 功能检测1:逆转录体系中加入200 U本品,以500 ng Hela cell total RNA为模板,Oligo(dT)18为引物,50 oC反应45分钟。取10% cDNA产物进行PCR扩增DNCH基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的5.6 kb条带。 功能检测2:逆转录体系中加入200 U本品,以100 pg Hela cell total RNA为模板,Oligo(dT)18为引物,50 oC反应30分钟。取10% cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的550 bp条带。 注意事项 1)请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。 2)为保证逆转录成功,建议使用高质量的RNA样本。 |
联系人:高小姐
手 机:13585831301
Q Q:3004967995
座 机:021-59541103
传 真:021-60443211
地 址:上海嘉定区嘉罗公路1661