产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
长片段DNA超速PCR MasterMix | Fast & Long DNA PCR MasterMix | 1ml|5ml | CS-01F97135 |
本品包含速长片段DNA聚合酶、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix终浓度为1×即可。本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
产品特点: 1.快的扩增速度:延伸速度可以达到5~10秒/kb,短半小时完成PCR。 2.突出的长片段扩增能力:可以扩增高达10kb的长片段(包括人类基因组此类的复杂模板)。 3.良好保真性:保真度是taq的3~6倍以上。 4.大扩增能力:产量高,对于一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高模板有良好效果。 注意事项: 1.本系统扩增速度极快,短片段或者简单模板如质粒模板可以尝试5秒/kb延伸速度并采用较少循环数以进一步缩短PCR时间。长片段(≥3kb)或者复杂模板产量较低可以采用15-20秒/kb延伸速度或者采用较多循环数。 2.本品产量较低时可尝试采用较长的延伸时间(如20秒/kb)和循环数(如35个)可以提高PCR产物的产量。 3.对于GC含量很高的模板,短片段预变性和变性温度可以提高到98℃和/或适当延长变性时间。长片段为了避免DNA损伤不应该提高变性温度,应该适当延长预变性时间到5分钟,变性时间可以适当提高5-10秒。 4.如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时,可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%,按照1%梯度增加摸索佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1~1.7M。并采用降落PCR(Touchdown PCR) |
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