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碘化丙啶(PI)染液(即用型) | PI Staining Solution (Ready-to-use) | 150T | CS-01F96992 |
本品是无菌的即用型PI染色液(溶于PBS),可进入死细胞内与DNA结合,并被活细胞排斥在外,适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测,若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测。
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物,能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发,产生相对较大的斯托克司频移后,并在617 nm处具有大发射波长。另外,PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性,PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用;也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。
使用方法 1)收集细胞,计数,高以1 x 106 cells/100 μl的量加入FACS分选管; 2)加2ml PBS(或HBSS)清洗细胞,300 x g离心5 min,去上清。重复一次。 注:若需要用抗体标记表面抗原,可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。 3)细胞清洗后,用100 μl流式细胞染色缓冲液(flow cytometry staining buffer)重悬细胞;加入10 μl PI染色液,轻柔混匀,冰上或者室温避光孵育10-15 min。 4)直接上机进行流式分析。注:PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。 注意事项 1)碘化丙啶(PI)是已知的诱变剂,操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。 2)流式细胞染色缓冲液可配制如下:1×PBS (w/o Ca2+ and Mg2+) + 0.5-1% BSA(或 5% FBS)+0.1% 叠氮钠。也可根据实验室自身体系调整。 3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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