此外，这类染料的激光光谱可以选择用与Fura-2 类似的滤光器与检测仪。.这些钠钾探针指示剂由荧光团与氮冠醚成环状连接，赋予各自的配位体选择性。在pH7，且Na 或K 离子缺失的情况下，SBFI 和PBFI 的消光系数大约在42,000 cm-1M-1（346 nm）。一旦与离子结合，其激发峰显著收窄，大激发峰向短波段偏移，光能量吸收比值变为340nm/380nm。SBFI 结合Na离子之后荧光度约增2.5 倍，但发射光谱大值基本不变。pH6.5～7.5，这类荧光素的光谱特性基本维持不变，相比较而言，离子浓度和粘度对其影响更大。

虽然这类离子指示剂有相当的选择性，但对于Na 离子亲和的SBFI 来说K 离子同样有一定的影响，PBFI 也是如此。在K 离子生理浓度下，SBFI 对于Na 的Kd 值为11.3mM，而没有K 离子存在时，则为3.8mM。SBFI 对Na 的选择性比K 要高出18 倍。

同样地，PBFI 对K 离子的解离常数也烈地依赖于Na 的存在。Na 的是否存在，使得PBFI 对于K 离子的Kd 从100mM 到10mM不等。虽然PBFI 对于K 离子的选择性仅仅高出Na 的1.5 倍，但在细胞的生理条件下，通常K 离子的浓度要高于Na 的10 倍以上。所以，在胞内加载探针时，这些探针的Kd 值应与适当的载体做校准。

用无水DMSO 制备PBFI AM 酯类的储液，浓度为10mM。PBFI AM 的相对分子量为1171.由于这类AM 酯形式的探针水溶性比较差，建议溶解时，使用必要的Pluronic F-127.通常可以在进行加载探针到细胞之前，将探针的DMSO 溶液与等体积25%（w/V）的PluronicF-127 混合。探针加载浓度范围：5μM～10μM，孵育时间40 分钟~4 小时。具体的加载条件好能参考相关文献或者实验摸索，因为该探针在不同的细胞内的Kd 值不同。校准细胞内PBFI 使用K+离子载体缬氨酶素。
一般来说，这些指示探针可以用340nm 激发光激发，但在380nm 荧光对于目的离子的浓度尤其敏感。发射峰的检测可以设置在500nm，计算Na+ K+的浓度。