产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
SYBR Green I(10000×) | SYBR Green I(10000×) | 50μl|100μl|1ml | CS-01F96888 |
采用琼脂糖电泳检测双链DNA时,SYBR GreenⅠ是灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很的荧光及高量子产额,DNA/SYBR GreenⅠ复合物的量子产额均为0.8。由于与核酸结合后能产生很的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。SYBR GreenⅠ的低检出限:20pg DNA(254nm);60pg DNA(300nm紫外透射);此外,SYBR GreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1~2ng,300nm紫外透射),比EB灵敏20至100倍。SYBR GreenⅠ用于电泳检测DNA时,既可预染,也可电泳后再进行染色。SYBR GreenⅠ用于琼脂糖电泳检测DNA后,可直接将DNA转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。此外,SYBR GreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用,可直接进行消化或连接。
使用说明: 点染法:用于琼脂糖凝胶电泳:取原液1μl加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1ml,再加入6×DNA Loading buffer上样缓冲液1ml混匀,(此时溶液为1:2000稀释,即为工作液)电泳时取1~2μl工作液和5μl电泳样品混匀后静置5min后直接上样。 胶染法:常规配置琼脂糖凝胶100ml,加热至融化,待温度将至50~70℃(感觉不烫手)加入该原液10μl。待胶凝固后即可电泳,电泳结束后即可在紫外照射下观察。 注意事项: 1.SYBR GreenⅠ应避光存放,原液保存于-20℃;建议分装冻存,短期可以4℃保存。 2.胶染法灵敏度较高,须将商品化的DNA marker稀释5~10倍后使用。 3.在预染色方法中,电泳时间不要过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。 4.在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I可以全部从双链核酸上去掉。 5.在紫外照射透视下,与双链DNA接合的SYBR Green I呈现绿色荧光。如果胶中含有单链DNA则颜色为橘黄而不是绿色。 6.SYBR Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。 |
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