产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
NadRed红色核酸染料 | 2000× NadRed Nucleic Acid Red | 1mL|5mL | CS-01F96817 |
NadRed红色核酸染料是一种EB (溴化乙锭)的升级换代产品,用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色。NadRed具有安全(致突变性极低且检测不到显著的细胞毒性)、灵敏度高、稳定性好等优点,凝胶中的核酸在使用本产品染色后用适当紫外灯(300nm左右波长)检测呈现红色荧光,适用于原先使用EB为染料的凝胶成像系统。
NadRed比EB和SYBR Green更安全。NadRed在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验(Ames test)结果表明,NadRed的诱变性远小于EB。EB在多种致突变测试中呈现很的诱变性,而NadRed仅仅在浓度高达20微克/毫升时,并在S9代谢活化时有非常微弱的诱变性。通常NadRed在凝胶中的工作浓度约为2微克/毫升,大大低于可导致诱变的浓度。NadRed和的另外一种安全型核酸染料NadGreen,由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞,从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜,进入活细胞并染色DNA,并且有报道SYBR Green可以烈增紫外线诱导的基因突变。 NadRed的使用方法和EB一致。NadRed可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶,也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便,而后者灵敏度要更高一些。但由于NadRed本身已经非常灵敏,通常采用把NadRed直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊情况,如核酸样品量特别少的情况等,则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。 本制品可室温保存,至少两年有效。 NadRed对于核酸的迁移率影响非常小,小于SYBR Green对于核酸迁移率的影响。 通过凝胶回收试剂盒或酚氯仿抽提,可以有效去除与DNA或RNA结合的NadRed,从而确保不会影响后续的连接、酶切、PCR、测序等常规的分子生物学用途。 注意事项: 制备好的NadRed琼脂糖凝胶,在4℃避光条件下通常可以保存3-5天。 NadRed琼脂糖凝胶再次熔化使用时,为取得更好的观察效果,需要添加适量NadRed。 电泳之后的凝胶不建议重复使用。 电泳后再使用NadRed染色的凝胶一般不需要脱色。如果发现背景太高,可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。 NadRed和NadGreen除了可以染色双链DNA外,也可染色单链DNA和RNA。NadRed对单链核酸的染色灵敏度约为对双链DNA染色灵敏度的一半。NadRed对单链核酸的染色灵敏度约为NadGreen的5倍。 如果使用聚丙烯酰胺凝胶,请使用浸泡染色法染胶,并延长染色时间至30分钟-1小时。 如果观察到条带弥散或者分离不理想,建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题,说明与染料无关,请尝试以下方法:使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。 本产品兼容常用的电泳缓冲液,例如TAE和TBE。 |
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