产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
质粒快速小提试剂盒(0.6~3mL) | QuickPure Plasmid Mini kit(0.6-3mL) | 200次 | CS-01F96666 |
本试剂盒操作简单快速、提取量高。整个提取过程不过10分钟,不需要离心收集细菌和重悬菌体,直接在培养好的菌液中加入独特的裂解液Buffer L2,随后中和、离心过柱,提取出的质粒可高达30μg,并大限度去除蛋白质、基因组等其它杂质。提取出的质粒DNA可直接用于细菌转化、酶切、PCR、体外转录、测序等其它下游实验。
保存条件:室温(15~30℃)
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项: 本试剂盒可在干燥、室温(15~30℃)环境下保存1年,如需保存更长时间可将离心柱置于2~8℃。 次使用前,将RNase A溶液全部加入到Buffer N3中,混匀,置于2~8℃保存。 次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。 使用前若Buffer L2有沉淀,请置于37℃水浴中不断混匀直至溶液变澄清方可使用。 操作步骤: 取600μL细菌培养液到1.5mL离心管(自备)中。 向上述离心管中加入100μL Buffer L2,温和地上下颠倒溶液8次,溶液应由浑浊变为澄清的紫色,表明裂解完全。裂解时间不应过2分钟。 向上述离心管中加入350μL Buffer N3(请先检查是否已加入RNaseA),立即上下颠倒约8~10次充分混匀,此时溶液应完全变为黄色并有黄色沉淀形成。13000rpm离心2~3分钟。 将步骤3中所得上清液缓慢倒入已备好的吸附柱吸附柱DM中,避免沉淀进入吸附柱。 13000rpm离心15秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。 向吸附柱中加入150μL Buffer PB,13000rpm离心15秒。 向吸附柱中加入400μL Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),13000rpm离心1分钟。
将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位加入30~100μL Buffer EB,13000rpm离心1分钟,收集质粒DNA,-20℃长期保存。 |
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