产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
柱式质粒DNA小量抽提试剂盒(1.5~5mL) | SgPrep Column Plasmid Mini-Preps Kit(1.5-5mL) | 50次|100次 | CS-01F96639 |
本试剂盒采用了一种新型的吸附材料,新吸附柱拥有良好的流速、的DNA结合能力和优秀的洗脱效率。改良的配方使试剂盒的菌液裂解能力、DNA与吸附柱的结合能力大大加,新型裂解染料Visualysis的加入让裂解过程变得可视、可控,实现质粒得率大化。对于高拷贝质粒,从6mL过夜菌液(OD600=2.0)中可以获得过35μg的质粒DNA。操作过程快速、方便,无需使用酚/氯仿抽提,无需乙醇沉淀,整个抽提过程可以在20分钟内完成。由本试剂盒抽提得到的质粒纯度高,OD260/OD280比值一般在1.8~1.9之间,OD260/OD230比值大于2.0,可直接用于转化、DNA测序、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切等后续实验。
试剂盒特点: 使用新型吸附柱材料,吸附容量大,洗脱效率高。 新型裂解染料Visualysis让裂解过程可视化,实现质粒得率大化。 操作过程快速、方便,无需使用酚/氯仿抽提,无需乙醇沉淀,全过程可在30分钟内完成。 保存:常温(18~25℃),RNase A收到后,请及时置于2~8℃保存,长期贮存请于-20℃放置。 注意: 加入RNase A后,Buffer P1请存放于2~8℃,有效期为半年。其他组分可于室温存放—年,长期存放请置于2~8℃。 Buffer P3和去蛋白液DW1中含有刺激性的化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。 快速操作流程: 准备工作。 □ 检查Buffer P1中是否已经加入RNase A。 □ 检查洗涤液WB中是否已经加入无水乙醇。 □ 检查Buffer P2和P3是否出现沉淀。 取1.5~5mL过夜培养的菌液,8000g离心2分钟收集菌体,弃尽培养基。 在沉淀中加入250μL Buffer P1,彻底悬浮菌体。 加入250μL Buffer P2,立即温和颠倒离心管5~10次混匀。室温静置2~4分钟。 加入350μL Buffer P3,立即温和颠倒离心管5~10次混匀。 12000g离心5~10分钟。将上清液移入吸附柱,8000g离心30秒,倒掉收集管中液体。 (选做)加入500μL去蛋白液DW1,9000g离心30秒,倒掉收集管中液体。 加入500μL洗涤液WB,9000g离心30秒,倒掉收集管中液体。 重复步骤8一次 空吸附柱9000g离心1分钟。
将吸附柱放入—个干净的1.5mL离心管中,在吸附膜中央加入50~100μL洗脱液EB,室温静置1分钟后,离心1分钟。保存管中DNA溶液。 |
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