产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
质粒小量提取试剂盒(5~15mL) | Plasmid DNA Mini Kit(5-15mL) | 50次 | CS-01F96597 |
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料,高效、专一吸附DNA,可去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。以下操作步骤适用于提取5~15mL过夜培养的大肠杆菌,质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件,细胞的裂解,质粒拷贝数,质粒的稳定性,抗生素等因素有关。
本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。
产品特点: 快速:步骤少,操作简单,节省时间。 高效:可提取菌体85%以上质粒DNA。 保存条件:室温(15~25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于 2~8℃。2~8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2~8℃保存,可稳定保存12个月以上。单独包装的RNase A在室温可稳定保存12个月以上。 注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项) 溶液P1在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A全部加入),混匀,置于2~8℃保存。 使用前先检查平衡液BL、溶液P2和P3是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。 注意不要直接接触溶液P2和P3,使用后应立即盖紧盖子。 所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心,速度为12000rpm (~13400×g)。 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液应在65~70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,以增加提取效率。 实验前使用平衡液处理吸附柱,可以大限度激活硅基质膜,提高得率。 用平衡液处理过的柱子好当天使用,放置时间过长会影响效果。
去蛋白液PD可以有效去除残留的蛋白杂质,当宿主菌为endA+(TG1、BL21、HB101、ET1256、JM101等)核酸酶含量较高的菌株时,烈推荐使用去蛋白液PD。 |
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