注意事项：

1、Wash Buffer在使用前按照试剂瓶所示体积加入无水乙醇，混合均匀。

2、Buffer GL在较低温度下易沉淀，若出现沉淀，使用前请在37℃加热几分钟，至沉淀溶解后再使用。

3、建议使用TAE电泳分离DNA，因为TBE中的硼酸与琼脂糖生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而降低DNA回收率。

4、尽量减少紫外照射的时间，以免损伤DNA。

5、水浴期间要间断性摇晃离心管，加速溶胶进行下一个步骤，减少DNA回收率的降低。

操作步骤：

1、将切割的凝胶转入预先称重的1.5ml离心管中，加入等体积的Buffer GL(100mg的凝胶加入100μl Buffer I)。放入55-60℃水浴中，间断摇晃混合，直至凝胶完全融化（约5-10min），放置使其冷却至室温。

2、将上述混合液加入DNA回收柱内，如果溶液体积>700μl，分次转移溶液；室温放置1-2min或更长时间。

3、在13000g离心1分钟，弃废液。目的DNA长度≤500bp时，离心结束后将收集管中的溶液再次转入DNA纯化柱中，离心。

4、在DNA纯化柱中加入650μl Wash Buffer，13,000g离心30秒，弃废液，将DNA纯化柱放回收集管。

5、重复步骤4。

6、13000g离心3 min，以去除柱中残余乙醇。

7、将纯化柱放入新的离心管中，向柱中加入在60℃下预热的30-50μl Elution Buffer或ddH2O，室温放置1-2min或更长时间。

注意：

a. 加入Elution Buffer后将柱子整个温育5min后再离心洗脱可以增加DNA回收效率。

b. 对大于8Kb的片段，加溶液Elution Buffer后将柱子整个温育15-30min可以提高回收效率。

8、13,000g离心1 min，所得液体即为高纯度DNA。

储存条件：室温，有效期12个月。