产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
全血基因组DNA提取系统(沉淀法) | Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation) | 50T|200T | CS-01F96566 |
本试剂盒适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的血液样品,采用异丙醇沉淀方法,操作简便,尤其适合大量提取血液基因组DNA。提取的DNA可用于PCR、酶切等常规分子生物学实验。少量样本也可选购我公司吸附柱型试剂盒(全血基因组,货号QN0893)。
保存:室温(15℃~25℃)干燥,有效期12个月。
注意事项: 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。 若试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。 使用前请根据使用量将10×红细胞裂解液用水稀释成1×的即用型红细胞裂解液。 使用方法: 本操作步骤以1mL全血为例 样品的处理:在血液中加入3倍体积的1×红细胞裂解液(请确认已经稀释过),充分颠倒混匀,12000rpm离心1min(如为大量提取并且为大离心机,可11000转离心5min),小心吸去上清,再加入2倍体积的1×红细胞裂解液,用移液器轻轻吹打沉淀,充分混匀,离心,弃上清,沉淀为白细胞。 向沉淀中加500μL白细胞裂解液,振荡或者用移液器吹打至彻底混匀。65℃水浴10~20min,期间可颠倒离心管混匀数次,直至溶液较为清澈看不见明显细胞为止。 加入500μL蛋白沉淀液,充分颠倒混匀,此时会出现白色沉淀,65℃水浴5min,12000rpm离心5min,小心吸取上清(不要吸到下层沉淀或漂浮不溶物),转移到干净离心管中,如还有沉淀物,可再次离心。 在上清中加入1mL异丙醇,混匀。12000rpm离心5min,可看到管底有少量白色DNA沉淀,弃掉上清。 向离心管中加入1mL 75%乙醇,12000rpm离心5min,弃去上清液。可再次短暂离心用移液器去除残余上清。 将离心管敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,否则乙醇可能影响后续的实验如酶切、PCR等。
向离心管中加入100~300μL DNA溶解液,室温放置让DNA自然溶解。如果DNA难于溶解,可室温放置过夜或将离心管置于50~60℃水浴中水浴加热5min。 |
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