产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
DNA纯化回收试剂盒(磁珠法) | MagBeads DNA Purification Kit | 5ml|50ml | CS-01F96556 |
本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的核酸纯化方法。该产品可用于二代测序建库时DNA的选择性或非选择性回收,以及PCR产物的纯化回收。试剂盒中的MagPure与样品按一定比例混合后,磁珠选择性将核酸吸附。经两步漂洗后,洗脱得到的DNA纯度高,A260/A280的比值在1.7-1.9之间,A260/A230的比值通常在2.0以上。经该试剂盒纯化得到的DNA适用于PCR,Real-Time PCR,测序,southern blotting等实验。
保存条件:2-8℃保存,室温运输。
自备仪器及试剂: 1.磁力架 2.80%乙醇。 3.洗脱液:Buffer EB (10mM Tris-HCl,pH8.0);去离子水(pH在7.0-8.0之间)。 实验前准备及重要注意事项: 1.冰冻、离心、声会对MagPure中的磁珠造成不可逆的损害。 2.MagPure中磁珠长期放置后会聚集成团,从而使磁珠表面积减小,降低样品回收得率,使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠。 3.使用前,建议将MagPure涡旋震荡混匀后分装到1.5ml的离心管中,每管分装1ml MagPure。 4.本试剂盒不适用于纯化回收小于100 bp的DNA片段,如果要回收小于100 bp的DNA片段,建议将MagPure的用量增加到样品体积的4倍。 5.进行DNA的选择性回收时,MagPure对于DNA溶液中的离子浓度较为敏感。不同厂家的二代测序建库试剂盒得到的接头连接后的DNA溶液以及PCR扩增产物中离子浓度不同,所以用MagPure做DNA选择性回收时,试剂用量有所不同。 操作步骤: 1.涡旋振荡MagPure 20秒,使其彻底混匀为均一溶液。 2.向1.5ml的离心管中加入纯化的DNA溶液。 3.向上一步的离心管中加入2倍样品体积的MagPure,涡旋震荡5秒后室温静置5分钟。 4.将上一步的离心管放于磁力架上,直至磁珠完全吸附(约需5分钟)。 5.保持离心管固定于磁力架上,彻底弃去溶液,期间避免接触磁珠。 6.继续保持离心管固定于磁力架上,向离心管中加入250μl新鲜配置的80%乙醇。 7.保持离心管固定于磁力架上,待悬起的磁珠完全吸附后彻底弃去乙醇。 8.重复步骤6-7两次。 9.保持离心管固定于磁力架上静置放置10分钟,使乙醇完全挥发干净。 10.将离心管从磁力架上取下,加入20-100μl EB(自备)或去离子水,涡旋振荡使磁珠完全重悬于洗脱液中后,室温放置5分钟。 11.将离心管放于磁力架上直至磁珠完全吸附(约需5分钟)。
12.将洗脱液转移至一个新的1.5ml离心管中。此时,可弃去磁珠。 |
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