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产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
唾液DNA收集提取试剂盒 | Saliva DNA collection, preservation,transport and extraction Kit | 10次|50次 | CS-01F96537 |
本试剂盒针对唾液样本中的DNA 进行收集、保存、运输、纯化。可提供无疼痛、非侵入性的方法,患者不用忍受抽血的疼痛和感染的风险就能获得高质量、高数量的样品,受测者排斥性低,婴儿和老人都能方便取得DNA样本。收集过程十分简单,受测者将唾液吐至保存液内混匀就完成收集过程。混匀后常温下可运输保存长达一年不会变质。能够节省运送、保存冷藏设备和电力费用。收集的唾液通过几个简单步骤便可提取DNA。抽取的DNA产量高达110μg/2mL唾液。
试剂盒组份(50次): 保存液———————————2ml×50 细胞裂解液—————————50ml 杂质沉淀液—————————85ml DNA溶解液——————————20ml 5ml采集管——————————50个 产品特点: 1.非侵入性采检方式免除了抽血的疼痛和降低了污染风险,并增加了取检的便利性,可由受检者自行取样。 2.仅需2ml的唾液样本,即可取得约110μg的DNA(不同个体产量差异很大)。 3.采样后的检体可稳定地储存于室温环境一年以上。 唾液样品收集步骤: 1. 用清水漱口1~2 次,然后吐掉。 2. 漱口后等候至少5 分钟方可采集唾液,期间不要进食、饮用各种饮料。 3. 将唾液(不是喉咙中痰液)吐到5ml 采集管中,直至2ml 刻度位置。(不可将痰液吐到收集管中,若唾液不足,可做口舌运动,促进分泌。浮在唾液上层的少量泡沫不包括计算在2ml 唾液采集量内,采集过程必须在30 分钟内完成) 4. 将等体积2ml 保存液全部倒在5ml 唾液采集管中,充分颠倒混匀后旋紧盖子。 唾液DNA提取步骤(2ml唾液量举例,可按比例放大缩小每次提取的唾液量): 1. 将保存液/唾液混合物放置于50℃ 水浴中至少1 小时或50℃ 空气孵箱至少2 小时。 2. 转移4ml 混合物(2 ml 唾液加2 ml 保存液)到一个15 ml 或者50 ml 的离心管。 3. 加入1ml 裂解液和10 μl RNase A 溶液(10mg/ml). 高速涡旋振荡10 秒后室温放置10分钟。 4. 加入1. 7 ml 杂质沉淀液到上述裂解混合物中。 5. 高速涡旋振荡25 秒,充分混匀杂质沉淀液和裂解混合物。 6. 2500g离心5分钟。沉淀的杂质和蛋白会在管底形成一个致密的沉淀团。如果蛋白沉淀不太致密,可以冰上放置5分钟,然后重复步骤6。 7. 仔细转移上清(含有DNA)到一个新的15 ml 或者50 ml 的离心管。注意不要触动管底沉淀。加入5ml 异丙醇。(唾液DNA 含量较低时,加入40μl Glycogen 20mg/ml可能提高一些产量) 8. 轻柔颠倒混匀50 次。 9. 2000g 离心3 分钟, 此时一般可在管底看到白色的DNA 沉淀。 10. 倒弃上清, 倒置后在吸水纸上轻敲几下以尽可能吸干。加入5ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗DNA 沉淀。 11. 2000g 离心1 分钟, 仔细倒去上清(沉淀很松,注意不要把DNA 沉淀倒掉了)。 12. 倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇,还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟(不要干过头,也不要残留乙醇)。 13. 加入250μl -400μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀,轻弹管壁混匀。 14. 可以放置在65℃温育30-60 分钟(不要过一小时),然后在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA,中间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
15. DNA 可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃ 或者-80℃。 |
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