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产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
一步法质粒大提试剂盒(10~100mL) | One-Step Plasmid Maxi Kit(10-100mL) | 5次 | CS-01F96533 |
本试剂盒是在我司一步法质粒(BTN70903)基础上开发的、能够快速从100mL左右的E.coli培养液中取质粒DNA的产品。它只需要一种溶液即可以完成细菌裂解,并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。它比经典的碱变性质粒制备方法更加快捷和方便。
试剂盒特点: 快速,整个质粒DNA提取过程只需要不到30分钟,比传统的碱变性方法快捷。 螺旋比例高,的非碱法一步式细菌裂解技术,避免了碱对DNA的损害,得到的质粒DNA切口更少。 DNA纯度高,几乎没有基因组DNA和RNA污染,OD260/280一般在1.7~1.9之间。 DNA可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆等实验。 大吸附量为600μg DNA,具体产率取决于质粒拷贝数。 过程简单,重复性和稳定性好。 保存条件: 常温运输及保存(溶液A需要4℃保存),有效期一年。 使用方法: 用50mL离心管分数次收集10~60mL新鲜的菌液,一般可以5000rpm 离心10分钟,去除上清即得细菌沉淀。 往细菌沉淀中加入14mL溶液A,充分振荡悬浮或吹打混匀。 注意:充分重悬细胞沉淀(无块状物)对于获得高的质粒产量十分重要。 将裂解液全部转移到大离心吸附柱中,放入到配套的收集管中。 6000rpm离心5~10分钟,弃穿透液。离心过滤柱将吸附溶液中的质粒DNA,而将基因组DNA和杂质在穿透液中。如果离心吸附柱中还有未离心下去的裂解液,可以适当延长离心时间直到离心吸附柱中没有残留液体。 将10mL通用预洗液加入到离心吸附柱中,室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。 重复上步一次。 将10mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。 重复上步一次。 室温6000rpm空甩5分钟,弃穿透液。注意:此步很重要,不能跳过。 将离心吸附柱放入一个自备的、干净的50mL塑料离心管中,加1mL通用洗脱液(洗脱液如加热到50~65℃效果更佳),室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,收集液即是质粒DNA溶液。 重复上步1次以便洗脱更多的质粒DNA。
合并所得质粒DNA,立即使用或-20℃储存。 |
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