产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法) | Fungus DNA Column large-scale extraction kit(Glass bead method) | 4次 | CS-01F96508 |
本试剂盒在柱式真菌(BTN70901)基础上改良而得大提升级产品,主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。
产品特点: 1.处理量大,一次可以处理1-3g 各种真菌组织。 2. 纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂,得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplex PCR、RAPD、RELP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。 3. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA。 4.产率一般在10-100μg/g真菌样品。离心吸附柱大吸附量为800μg。 5. DNA片段长度一般在20-40kb左右。 6.适用范围广,适用于度大多数真菌材料,包括酵母(S.cerevisiae、S.pomb、Pichia pastoris)等。 储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。 使用方法: 1. 对菌液:取60-100mL 过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。 2. 对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约1 g),转移到装有20mL 无菌水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。 3. 对孢子材料,一般取1-3g左右,直接加入到离心管中,在材料中加入无菌水20mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。 4.沉淀中加入10mL溶液A和10 克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟,可以延长震荡时间。 5. 加入10mL的溶液B,涡旋震荡5分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个50mL的干净的塑料离心管中。 6.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。 7. 将20mL 通用洗柱液加入离心柱,12000rpm离心1分钟,弃穿透液。 8. 重复上步操作一次。 9. 12000rpm 空甩1分钟去除残留液体。 10. 将离心柱放置在一新的50mL塑料离心管中,加入500μL DNA 洗脱液2.0。 11.室温放置5分钟后12000rpm离心1分钟,管底即为真菌DNA样品,吸取离心管中的DNA溶液重新滴加在吸附柱上,离心洗脱以收集更多的DNA。 12. 所得DNA可立即使用,也可长期保存在-20℃。
13. 注:如离心机转速不能达到12000rpm,可以用大转速离心10-15min 代替12000rpm离心1-2min。 |
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