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RNA快速提取试剂盒(多糖多酚植物) | Complex Plant RNA Extraction Kit | 50次 | CS-01F96432 |
本试剂盒适用于多糖、多酚及其他复杂植物组织细胞总RNA快速提取,无、氯仿RNA快速提取技术基础上,又采用基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶, 离心沉淀去除多糖多酚和次级代谢产物,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,然后RNA被选择性洗脱滤过, 吸附在基因组DNA清除柱上的残留DNA无法洗脱连同柱子一起丢弃从而清除掉DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点: 1.完全不使用有毒的,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。 2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成,简单快速的试剂盒。 3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。 4.可以提取包括复杂中草药如石斛/丹参/雪莲/人参、复杂淀粉种子如水稻/小麦/玉米种子、复杂果实如葡萄/蓝莓/草莓/西瓜果实、复杂抗逆植物如冬青/松针/沙棘/胡杨、复杂花卉月季/玫瑰/梅/牡丹花、复杂多糖植物紫菜/仙人掌/芦荟水稻种子等数百种国内外试剂盒提取失败的样品。 5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,无DNA残留,可用于荧光定量PCR、RT-PCR、芯片、二代测序、Northern-blot等各种实验。 注意事项: 1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 需要自备β-巯基乙醇,乙醇,研钵(可选)。 3. 样品处理量绝对不要过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。 4. 裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。 5. 关于DNA 的微量残留: 一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本试剂盒产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时: 1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。 2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。 3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup) ,请联系我们索取具体操作说明书。 4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。 储存条件:室温,有效期12个月。 本制品别名:多糖植物RNA提取试剂盒|多酚植物RNA提取试剂盒|复杂植物RNA提取试剂盒|中草药RNA提取试剂盒|种子RNA提取试剂盒|根茎RNA提取试剂盒| |
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