产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
DNA消化试剂盒(DNase I) | DNA digestion kit | 1500U | CS-01F96427 |
Dnase I中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5'端为磷酸基团,3'端为羟基。DNase I活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
经过本试剂盒独特的反应液消化后不需要繁琐的/氯仿抽提灭活,可直接用于反转录反应,使用起来非常快速方便。
活性单位:37℃ 10分钟内,将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。 来源:大肠杆菌表达的31kd重组蛋白。 酶贮存缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2,50% (v/v)glycerol。 10×DNase Buffer:100mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2。 纯度:不含其它DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。 适用范围:制备不含DNA的RNA样品;RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污染;体外T7,T3,SP6等RNAPolymerases催化的RNA转录后去除DNA模板;DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用;缺口平移(nick translatioin);产生DNA随机片断文库;细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。 注意事项: 每μl DNase I多处理不过3μg RNA。如果需要RNA较多,需要根据RNA的处理量按比例放大DNase I、10×DNase Buffer使用量和反应体积。如果处理后需要得到纯净RNA,可以使用RNA清洁纯化试剂盒在第2步后(37℃孵育30分钟后)直接清洁纯化(不需要加EDTA Stopper和65℃孵育10分钟的步骤了)。 |
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