操作步骤：

1、根据要保存的各样本的体积，计算出所需保存液用量。保存液的用量应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml保存液)；离心收集2×107细胞保存液的用量是1ml。加入保存液的原则是：量宁多勿少。

建议在实际操作中不要称量组织，而直接根据目测结果加入保存液量，以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块，体积为125mm3=125μl，故应当加入1.25ml的保存液液。

2、将保存液按需要量分装入自备保存管中；

3、快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，较小的组织直接取下，立即完全浸入保存液中。

注：组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则保存液不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0.5 cm的任意片状后保存，较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官)则可以直接浸入保存液。

4、保存时先将样本浸入保存液后置4℃冰箱过夜(注：4℃过夜是必需的，这样可使保存液完全渗入到组织中)，然后转移到-20℃冰箱(保存液在-20℃时可能为液态，也可能为固态，如有结晶析出，也是正常情况)；或者在4℃冰箱过夜后，直接转移到-80℃冰箱。在保存液中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

注意事项：

1、组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入保存液，以防止RNA降解。

2、冰冻组织不能用保存液保存，因为保存液不能有效渗入冰冻组织。

3、保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复温到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除保存液，再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量保存液保存液不影响后继提取RNA的质量。

4、保存液在动物组织(如大鼠，脾脏)和细胞(如DH5α)RNA的保护中效果不错；植物材料种类繁多，没能一一测试(烟草和拟南芥叶片中的RNA能被保存液有效保护)，建议预实验后再使用。

储存条件：15～25℃，有效期24个月。