产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
快速核酸银染试剂盒 | Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid | 1000ml | CS-01F96409 |
分子生物学实验中,常利用银染的方法显示聚丙烯酰胺凝胶或者琼脂糖凝胶中的核酸条带,其检测原理是:银离子(Ag+)可与核酸形成稳定的复合物,随后Ag+ 在碱性环境下被还原剂如甲醛还原成银颗粒,后者通过显色可把核酸电泳条带染成黑褐色。该方法检测灵敏度比EB高达200倍,常用于检测SSR标记、SNP标记等。
常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等若干个步骤组成,操作十分繁琐,尤其不适用于大批量实验。而本品的推出可大大改善上述问题,主要体现在:1)快速,整个过程仅需20分钟;2)操作简单,只有染色和显影两步;3)灵敏度跟常规方法相当,比EB高200倍,能检测到10ng的DNA条带。4)两个成分都是现用现配,可重复性好。
按照本方案提供的配制方法,共可配制试剂A和试剂B分别1000ml。
产品组份: 组分名称 规格 试剂A 1 2g 试剂A 2(10×) 100ml 试剂A 3(10×) 100ml 试剂B 1(10×) 100ml 试剂B2 5ml 注意事项: 1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2)银染主要出现在PAGE胶的表面,因此该方法更适合用于薄胶(0.5-0.75mm)的检测。 3)染色过程中,缓慢的振荡是必要的,一般选择40-60 rpm。 4)凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致,所以全程操作中都应带手套。 5)PAGE凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的,所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS的去离子水。 6) 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面,可能是几步漂洗过程不够彻底,或染色过程温度太低。 7)较深的银染背景多是丙烯酰胺中的杂质所致。 8)室温操作时,温度的波动往往会干扰银染的效果,恒温水浴可以解决这个问题。 9)染色使用的玻璃器皿必须非常干净,用酸浸泡可以满足要求。 10)银染应尽快照相,随着时间延长,蛋白条带会变浅,而背景会加深。 11)影响硝酸银染色效果的因素很多,其使用容器的材质也是一个非常重要的因素。通常玻璃平皿是理想的银染容器,其化学性质极其稳定,几乎不与银染试剂中的任何成分发生反应,且不具有吸附染料的特性。其次是医用搪瓷盘,瓷釉为无机玻璃质材料,能耐各种浓度的无机酸(包括氧化性酸)、有机酸、弱碱和有机溶剂,但不耐酸、碱介质交替使用,而常规银染法就是酸碱介质交替使用,因此搪瓷盘银染效果不如玻璃平皿。塑料种类较多,如果塑料是由含氨基官能团的有机物(脲、三聚氰胺或苯代三聚氰胺)与醛类(主要是甲醛)化合物经缩聚反应而得,则这种塑料会在碱性溶液中与有还原作用的甲醛发生反应,进而使甲醛消耗,减弱银离子与蛋白的结合,降低显色敏感度和显色速度。 |
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