本试剂盒采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNase、DNase，然后裂解混合物通过一个基因组DNA吸附柱，基因组DNA被吸附而RNA和蛋白穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗、离心后，洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于RNA吸附柱上，再通过一系列快速的漂洗、离心洗脱得到纯RNA。滤液经选择性沉淀得到蛋白。

试剂盒特点：

完全不使用有毒的，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

快速，简捷，单个样品总RNA、基因组DNA和蛋白分离操作一般可在1小时内完成。

独特的吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留，一般情况下得到的RNA不需要DNase消化可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。

多次柱漂洗确保RNA、基因组DNA高纯度，可直接用于下游各种实验。

试剂盒组成：

组分 规格

裂解液RLT Plus 50mL

Wash Solution 1 12mL

Wash Solution 2/3 10mL

RNase-free H2O 10mL

抑制物去除液IR 25mL

漂洗液WB 15mL

缓冲液APP 60mL

洗脱缓冲液EB 10mL

基因组DNA吸附柱DA和收集管 50套

RNA吸附柱RA和收集管 50套

保存：RT，有效期12个月

保存注意事项：

所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。

不合适地保存于低温（4℃或者-20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15～25℃）进行。

避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

注意事项：

所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C或者类似离心机。

样品处理量绝对不要过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，过5mg就会过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，过3×106细胞就会过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不过3～4×106，组织不过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。

裂解液RLT Plus、抑制物去除液IR、Wash solution 1、Wash solution 2/3中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

该试剂盒如需要用于植物样品尤其是多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA、RNA提取，请咨询我司技术人员，可能需要用到其它试剂。

额外购买microRNA吸附柱子和配套溶液，还可以将同一个样品的总RNA和microRNA分离并提取，富集microRNA。如有需要请咨询我公司。

关于DNA的微量残留：

一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的AllExtract组织细胞RNA/DNA/蛋白分提试剂盒，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA分离清除技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：

选用跨内含子的引物，以穿过mRNA中的连接区，这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。

选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。