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超纯血液总RNA提取试剂盒(TRIzol法) | Ultra Pure Total RNA Extraction Kit From Blood | 20次|50次 | CS-01F96381 |
本试剂盒本试剂盒适用于快速提取全血高纯度总RNA。采用改进的异硫氰酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA 酶, 然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除, 后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
产品组分: 组份 20次 10X红细胞裂解液RLB 10ml 裂解液RL 25ml 去蛋白液RE 15ml 漂洗液RW 5ml RNase-free H2O 10ml 70%乙醇 4ml RNase-free H2O 吸附柱 20个 收集管(2ml) 20个 产品特点: 1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2. 结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好,纯度高和离心柱方便快捷的优点,不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程,RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。 3. 独特的RL裂解液配方,可以有效的消除基因组污染。 4. 多次漂洗去蛋白过程,提取RNA纯度更高。 5. 有效的去除了5S在总RNA中含量,提高了纯度。 注意事项: 1. 次使用前请先在漂洗液瓶和70%乙醇瓶中加入量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入! 2. 所有离心步骤如未加说明,均在室温进行。使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。 4. 考虑到环保问题,本试剂盒不含有实验室常用试剂氯仿,用户使用前需要自备氯仿。 5. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带,分别为~5Kb(28S),~2Kb (18S),条带亮度比值约为2:1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S,tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4,5条带也属于正常现象,如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。 6. 检测OD260/OD280吸光度比值时,RNA样品应该溶于TE后检测,如果用水稀释后检测,由于一般水离子度和PH值低,会使OD280升高,从而使比值降低。 7. 加入裂解液RL匀浆后,加氯仿前,样品可在–60℃-70℃ 保存一个月以上。 8. 关于DNA的微量残留: 一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留, 在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时: 1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。 2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。 3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。 4) 在步骤去蛋白液RE 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 消化处理。 储存条件:室温,有效期12个月。(裂解液RL需4℃避光保存) 本制品别名:全血RNA提取试剂盒|血液RNA提取试剂盒|全血总RNA提取试剂盒 |
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