试剂盒特点：

1.从总RNA中直接分离纯化小RNA，不需要使用离心吸附柱。得到的小RNA长度大部分在200nt以下，包括5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。

2.操作简单快速，整个过程只需要约30分钟。

3.小RNA纯净，OD260/280一般都在1.9以上。

4.可用于RT-PCR、miRNA标记、microarray等后续实验。

5.此方法能去除90%左右的大RNA，但会有少量残留大RNA，如果需要纯度更高，可以选择PAGE回收法。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

1.在纯化好的100μL总RNA(含大RNA和小RNA)中，加入50μL溶液A，振荡30秒混匀。如果RNA样品体积不足100μL，可以用RNase-free水补足，如果体积过100μL，可以用本公司核酸浓缩剂浓缩到100μL。

2.室温12000～15000g离心30分钟。小RNA在上清中，大RNA在沉淀中。

 注意：离心时间不能短于30分钟，否则大RNA沉淀不充分。

3.小心将上清液转移到干净的1.5mL RNase-free塑料离心管中。留下的沉淀可以用75%乙醇洗涤后做大RNA电泳对照用。

4.在上清液中加入200μL溶液B，振荡30秒混匀。

5.室温12000～15000g离心10分钟，小心弃上清。由于溶液B中有惰性的助沉剂，所以得到的小RNA沉淀肉眼可见。

6.加入1mL溶液C，震荡数秒。

7.室温12000～15000g离心10分钟，小心弃上清。

8.短暂离心数秒，小心吸弃残留液体(约50μL左右)。

9.在沉淀中(含小RNA)加入30～100μL RNase-free水，吹打溶解即得小RNA溶液。注意：不能只吹打管底部分，还需要吹打整个离心管管壁的离心面部分，因为上面也有有小RNA沉淀。

10.好先PAGE-银染检测小RNA纯度再使用。