产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
总RNA抽提试剂(Trizol法) | BalbZol Total RNA Extraction Reagent | 100ml | CS-01F96334 |
本试剂是一种用于动植物细胞或组织及细菌总RNA抽提的试剂。本产品采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法,抽提的方法和步骤完全相同。本试剂的颜色和TRIzol相同,加入氯仿后上层呈无色,下层呈紫红色,便于吸取上层水相。
本试剂可以抽提长达15 kb的RNA,也可以抽提microRNA等小RNA。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。裂解细胞或和组织共匀浆时,本试剂可以保持样品中RNA的完整性,即可以有效抑制RNA的降解。每一百万细胞用本试剂抽提可得5-15μg RNA;每毫克组织用本试剂抽提可得1-10μg RNA。产量因细胞和组织不同而异。每100ml本试剂可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。抽提两个样品约需一小时。 本试剂抽提所得RNA可直接用于Northern,点杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase protection assay,cDNA克隆,以及RT-PCR;也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序等对RNA质量要求较高的情况。 我公司的BalbZol和Trizol的成分有细微差别,实际抽提效果无任何显著差异。 注意事项: 本制品可4℃保存,有效期一年。 需自备氯仿,异丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。DEPC水(YT528)可向订购。 所有离心管,枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或Milli-Q级水中,处理过夜,灭菌即成DEPC水。 使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA,推荐先加入适量本试剂,并裂解样品后冻存。 必须戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。 本试剂含有毒物质,避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触本试剂,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。 本试剂抽提总RNA的同时,理论上也可抽提蛋白和DNA,但未经测试。有兴趣者可按Invitrogen公司的TRIzol的操作步骤进行操作。 |
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