产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
固定组织RNA提取试剂盒 | RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit | 50次 | CS-01F96328 |
本试剂盒适用于从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中有效纯化总RNA。适合从小于30mg的石蜡包埋组织或切片中抽提高纯度的总RNA,本试剂盒无需使用酚/氯仿抽提和异丙醇沉淀,一小时内即可完成多个样品的抽提。本品使用专门优化的裂解液和蛋白酶K,释放福尔马林固定或组织切片样本中的RNA,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除由福尔马林交联造成的抑制作用,有效释放组织切片中的RNA,而避免危害RNA的完整性;优化的缓冲系统使裂解液中的RNA可特异结合到硅胶吸附膜上,而其他污染物可流过膜;可通过漂洗步骤有效去除,经过洗脱的RNA可直接用于RT-PCR、Real-Time PCR和印迹分析等实验。
保存:室温(15~30℃),其中10×反应缓冲液、DNase I需-20℃保存。
自备试剂:
无水乙醇(新开封或提取RNA专用)、10mM PBS(PH7.4)。
实验准备: 向蛋白酶K中加入0.625mL蛋白酶K储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K溶液勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。 预防RNase污染,应注意以下几方面: 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。 配制溶液应使用RNase-Free Water。 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。 获得样品后,要尽快将样品在4%~10%的福尔马林中固定,固定时间以14~24小时为宜,时间过长易导致RNA断裂,影响下游实验。 确保包埋前的样品彻底脱水,残留的福尔马林会抑制蛋白酶K的作用。 次使用前应按试剂瓶标签说明先在缓冲液RW2中加入无水乙醇。 使用前请检查缓冲液GTL、缓冲液GL和缓冲液DS是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将缓冲液GTL、缓冲液GL和缓冲液DS于56℃水浴重新溶解。 |
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