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生化检测试剂盒 > 微量检测试剂盒 > 磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)试剂盒微量法100T/48S
产品名称:
磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)试剂盒微量法100T/48S
型号:
CS-01S63840
生产地址
进口、国产
产品价格
电议
产品简介
磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)试剂盒质量可靠、价格优惠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点。
产品详情

一、概述:

 公司上万种科研产品,主要供应各大科研单位和学校,是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关,确保每一个出厂产品质量合格,让您买的省心,用得放心。

产品名称

检测方法

规格

货号

磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)试剂盒

微量法

100T/48S

CS-0163840

   注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

磷脂酶A2EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂酰基水解酶,广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中,参与脂肪消化,精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程,在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。

商品介绍:

测定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱(HEPC)产生游离巯基,与DTNB反应生成黄色物质,在412nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、超速冷冻离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。

试剂组成和配制

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体×5瓶,-20℃避光保存。临用前根据用量每瓶加入1.8mL试剂二充分混匀;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样品处理

1.组织:按照质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心5min,取全部上清于4℃、100000g离心30min,弃上清,取沉淀溶于1mL试剂一。

2.细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后于4℃,10000g离心5min,取全部上清于4℃、100000g离心30min,弃上清,取沉淀溶于1mL试剂一。

3.血清:直接测定。

测定操作

计算公式

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1.按照蛋白浓度计算

酶活性定义:每毫克蛋白每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。

PLA2活性(nmol/min/mg prot= A÷(×d)×V反总÷(V样×Cpr)÷T

= 73.53×△A÷Cpr

2.按照样本质量计算

酶活性定义:每克组织每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。

PLA2活性(nmol/min/g 鲜重)= A÷(×d)×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T

= 73.53×△A÷W

3. 细胞数量计算

酶活性定义:每104个细胞每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。

PLA2活性(nmol/min/104 cell= A÷(×d)×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总)÷T

= 73.53×△A÷细胞数量

4按照液体体积计算

酶活性定义:每毫升血清每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。

PLA2活性(nmol/min/mL= A÷(×d)×V反总÷V样÷T

= 73.53×△A

TNB消光系数,13600L/mol/cmd:比色皿光径,1cmV反总:反应总体积,1mLV样:反应体系中加入样本体积,0.1mLW:样本质量,gV样总:加入提取液体积,1mL

T:反应时间,10min

b. 96孔板测定的计算公式如下

1.按照蛋白浓度计算

酶活性定义:每毫克蛋白每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。

PLA2活性(nmol/min/mg prot= A÷(×d)×V反总÷(V样×Cpr)÷T

=147.06×△A÷Cpr

2.按照样本质量计算

酶活性定义:每克组织每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。

PLA2活性(nmol/min/g 鲜重)= A÷(×d)×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T

= 147.06×△A÷W

3. 细胞数量计算

酶活性定义:每104个细胞每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。

PLA2活性(nmol/min/104 cell= A÷(×d)×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总)÷T

=147.06×△A÷细胞数量

4按照液体体积计算

酶活性定义:每毫升血清每分钟水解HEPC产生1nmol游离巯基所需的酶量为一个酶活力单位。

PLA2活性(nmol/min/mL= A÷(×d)×V反总÷V样÷T

= 147.06×△A

TNB消光系数,13600L/mol/cmd:比色皿光径,0.5cmV反总:反应总体积,1mLV样:反应体系中加入样本体积,0.1mLW:样本质量,gV样总:加入提取液体积,1mL

T:反应时间,10min

注意:

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

标签:磷脂酶A2(phospholipase A2 PLA2)试剂盒 

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