公司上万种科研产品,主要供应各大科研单位和学校,是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关,确保每一个出厂产品质量合格,让您买的省心,用得放心。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
苯丙氨酸解氨酶(Phenylalnine ammonialyase,PAL)试剂盒 | 微量法 | 100管/96样 | CS-01S63809 |
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
PAL(EC4. 3 1 5)广泛存在于各种植物和少数微生物中,是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶,与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关,在植物正常生长发育和抵御病菌侵害过程中起重要作用。
测定原理
PAL催化L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在290nm处有最大吸收值,通过测定吸光值升高速率计算PAL活性。
所需的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体15mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入4mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存;
试剂三:液体1mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至290nm,蒸馏水调零。
2、准备96孔UV板一块(非普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于340nm务必使用UV板)。
3、在EP管或96孔UV板中按顺序加入下列试剂
PAL活性计算
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白在每mL反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.1为一个酶活性单位。
PAL(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(Cpr× V样)÷0.1÷T =13.3×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位定义:每g组织在每mL反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.1为一个酶活性单位。
PAL(U/g鲜重)=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.1÷T =13.3×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,0.2mL; V样:加入样本体积,0.005mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
用96孔板测定的计算公式如下
(1) 按蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白在每mL反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.05为一个酶活性单位。
PAL(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(V样×Cpr)÷0.05÷T =26.6×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位定义:每g组织在每mL反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.05为一个酶活性单位。
PAL(U/g鲜重)=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.05÷T =26.6×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,0.2mL; V样:加入样本体积,0.005mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
联系人:高小姐
手 机:13585831301
Q Q:3004967995
座 机:021-59541103
传 真:021-60443211
地 址:上海嘉定区嘉罗公路1661