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生化检测试剂盒 > 微量检测试剂盒 > 超氧阴离子(Oxygen free radical, OFR)试剂盒微量法100T/96S
产品名称:
超氧阴离子(Oxygen free radical, OFR)试剂盒微量法100T/96S
型号:
CS-01S63808
生产地址
进口、国产
产品价格
电议
产品简介
超氧阴离子(Oxygen free radical, OFR)试剂盒质量可靠、价格优惠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点。
产品详情

一、概述:

 公司上万种科研产品,主要供应各大科研单位和学校,是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关,确保每一个出厂产品质量合格,让您买的省心,用得放心。

产品名称

检测方法

规格

货号

超氧阴离子(Oxygen free radical, OFR)试剂盒

微量法

100T/96S

CS-0163808

   注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。

商品介绍:

测定原理:

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据ΔA值可以计算样品中O2-含量,反应式为NH2OH + 2O2 H NO2 H2O2 H2O

自备实验用品及仪器:

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、氯仿和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体110mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂四:氯仿,自备。

超氧阴离子提取

1.植物、动物组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后,10000g4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。

2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。

3.血清或培养液:直接测定。

测定操作表

1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至530nm

2、操作表

超氧阴离子含量计算公式

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.0242x - 0.0027R2=0.9980

1. 组织:

1)按照样本质量计算

超氧阴离子含量(nmol/g 鲜重)= (ΔA+0.0027)÷0.0242×V反总÷(V样÷V样总×W)×2

=148.76×(ΔA+0.0027)÷W

超氧阴离子产生速率(nmol/ gmin=148.76×(ΔA+0.0027)÷W÷T

=7.44× (ΔA+0.0027)÷W

2)按照蛋白质浓度计算

超氧阴离子含量(nmol/mg prot= (ΔA+0.0027)÷0.0242×V反总÷(V样×Cpr)×2

=148.76×(ΔA+0.0027)÷Cpr

超氧阴离子产生速率(nmol/ mg protmin= 148.76×(ΔA+0.0027)÷Cpr÷T

=7.44× (ΔA+0.0027)÷Cpr

2. 细菌,真菌:

超氧阴离子含量(nmol/104 cell= (ΔA+0.0027)÷0.0242× V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)×2

= 148.76×(ΔA+0.0027)÷细胞数量

超氧阴离子产生速率(nmol/104 cellmin= 148.76×(ΔA+0.0027)÷细胞数量÷T

=7.44× (ΔA+0.0027)÷细胞数量

3. 血清或培养液

超氧阴离子 含量(nmol/mL= (ΔA+0.0027)÷0.0242×V反总÷V样×2

=148.76× (ΔA+0.0027)

超氧阴离子产生速率(nmol/mLmin= 148.76× (ΔA+0.0027) ÷T

= 7.44× (ΔA+0.0027)

V样总:加入提取液体积,1 mL V反总:反应总体积,0.36mLV样:反应中样品体积,0.2mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样品质量,gT:反应时间,20min2: 2分子O2-参与反应生成1分子NO2-。

b.96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.0121x - 0.0027R2 = 0.9980

1. 组织:

1)按照样本质量计算

超氧阴离子含量(nmol/g 鲜重)= (ΔA+0.0027)÷0.0121×V反总÷(V样÷V样总×W)×2

=297.52× (ΔA+0.0027)÷W

超氧阴离子产生速率(nmol/ gmin=297.52× (ΔA+0.0027)÷W÷T

=14.88× (ΔA+0.0027)÷W

2)按照蛋白质浓度计算

超氧阴离子含量(nmol/mg prot= (ΔA+0.0027)÷0.0121×V反总÷(V样×Cpr)×2

=297.52× (ΔA+0.0027)÷Cpr

超氧阴离子产生速率(nmol/ mg protmin= 297.52× (ΔA+0.0027)÷Cpr÷T

=14.88× (ΔA+0.0027)÷Cpr

2. 细菌,真菌:

超氧阴离子含量(nmol/104 cell=(ΔA+0.0027)÷0.0121× V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)×2

=297.52× (ΔA+0.0027)÷细胞数量

超氧阴离子产生速率(nmol/104 cellmin=297.52× (ΔA+0.0027)÷细胞数量÷T

=14.88× (ΔA+0.0027)÷细胞数量

3. 血清或培养液

超氧阴离子 含量(nmol/mL=(ΔA+0.0027)÷0.0121 ×V反总÷V样×2

=297.52×(ΔA+0.0027)

超氧阴离子产生速率(nmol/mLmin= 297.52×(ΔA+0.0027) ÷T

=14.88×(ΔA+0.0027)

V样总:加入提取液体积,1 mL V反总:反应总体积,0.36mLV样:反应中样品体积,0.2mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样品质量,gT:反应时间,20min22分子O2-参与反应生成1分子NO2-。

注意事项

1OD值大于1,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。

2、样品制备好后,立刻进行测定,请勿将样品进行长时间的低温保存,以免影响测定结果。

3、试剂四有一定的毒性,请操作时做好防护措施。

注意:

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

标签:超氧阴离子(Oxygen free radical  OFR)试剂盒 

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