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产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
土壤谷氨酰胺酶(solid-glutaminase, S- GLS) 活性测定试剂盒 | 微量法 | 100管/96样 | CS-01S63783 |
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
GLS(EC
测定原理:
S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。
需自备仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。
试剂组成和配制:
试剂一×1瓶,15 mL,4 ℃保存;
试剂二×1瓶,40 mL,4 ℃保存;
试剂三×1瓶,60 mL,常温保存;
试剂四×1瓶,5 mL,常温保存;
试剂五×1瓶,3 mL,常温保存;
试剂六×1瓶,3 mL,常温避光保存。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至420nm,蒸馏水调零。
2、样品测定(在EP管中加入下列试剂):
酶活性计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 3.8488x+0.0057;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值A。
单位定义:每g土样每min催化谷氨酰胺生成1nmol 氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS(nmol/min/g 土样)=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V反总÷W÷T=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。
V反总:反应体系总体积:1.05mL;T:反应时间,2h=120min;W:样本质量,g; 1000,μmol到nmol换算系数。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 1.9244x+0.0057;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值A。
单位定义:每g土样每min催化谷氨酰胺生成1nmol 氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS(nmol/min/g 土样)=(ΔA-0.0057)÷1.9244×V反总÷W÷T=4.55×(ΔA -0.0057)÷W。
V反总:反应体系总体积:0.525mL;T:反应时间,2h=120min;W:样本质量,g; 1000,μmol到nmol换算系数。
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
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