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产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
土壤β-木糖苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)测定试剂盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01S63780 |
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
β-木糖苷酶(EC
测定原理:
S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰,测定405nm光吸收增加速率,可计算S-β-XYS活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体1mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
约0.1g鲜土或风干土样,加入1mL提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g,4℃,离心10min,取上清待测。
测定操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至405nm。
2、操作表
β-木糖苷酶活性计算公式:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值ΔA。
酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V样总:加入提取液体积,1mL; V反总:反应总体积,0.12mL;V样:反应中样品体积,0.04mL; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y=6.613x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值ΔA
酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=32.66×(ΔA-0.0011)÷W
V样总:加入提取液体积,1mL; V反总:反应总体积,0.12mL;V样:反应中样品体积,0.04mL; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;
ΔA控制在0.01-1范围内,若ΔA大于1,可适当减小样本量。
标准曲线线性范围为:0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
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