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产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
半胱氨酰亚砜裂解酶(L-cysteine sulfoxide lyase, CSL)试剂盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01S63701 |
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱),十字花科芸薹属
测定原理
CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生丙酮酸,与2,4-二硝基苯肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm下有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、酶标仪、96孔板、恒温水浴锅、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,4℃避光保存,临用前加入2mL水溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存,临用前加入10mL水溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存;
试剂三:液体15mL×1瓶,4℃保存。
试剂四:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂五:液体30mL×1瓶,4℃保存。
样本处理
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆,4℃浸提40min。12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定操作
计算公式
标准曲线:y = 0.7313x + 0.0027,R2 = 0.9993;x为标准品浓度:μmol/mL;y为吸光度△A
1.按蛋白含量计算
C-S lyase活性(μmol/min/mg prot)=(△A -0.0027)÷ 0.7313×V样÷(V样×Cpr )÷T
=0.068×(△A-0.0027)÷ Cpr
2. 按照样本质量计算
C-S lyase活性(μmol/min/g 鲜重)=(△A -0.0027)÷ 0.7313×V样÷(V样÷V样总×W )÷T
=0.068×(△A-0.0027)÷ W
V样,加入样本上清体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T,反应时间,20min。
注意事项
1.若测定结果中吸光值超过1,请将样本稀释后进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。香菇类样本活性较大,可能需要稀释80-100倍。
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
联系人:高小姐
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