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生化检测试剂盒 > 分光检测试剂盒 > 焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(Pyrophosphate: fructose-6 – phosphate-1-
产品名称:
焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(Pyrophosphate: fructose-6 – phosphate-1-
型号:
CS-01S63254
生产地址
进口、国产
产品价格
电议
产品简介
焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(Pyrophosphate: fructose-6 – phosphate-1-phosphoric acid transferase,PFP)试剂盒质量可靠、价格优惠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点。
产品详情

一、概述:

 公司上万种科研产品,主要供应各大科研单位和学校,是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关,确保每一个出厂产品质量合格,让您买的省心,用得放心。

产品名称

检测方法

规格

货号

焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(Pyrophosphate: fructose-6 – phosphate-1-phosphoric acid transferase,PFP)试剂盒

分光光度法

50/48

CS-0163254

 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:

焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(PFPEC2.7.1.90)是一种胞质酶,广泛存在于植物组织中,催化果糖-6-磷酸与果糖-1,6-二磷酸之间的可逆转化,在光合作用碳代谢中起重要作用。

商品介绍:

测定原理

PFP催化6-磷酸果糖转化为1,6-二磷酸果糖,它在醛缩酶和磷酸丙糖异构酶的作用下转变为3-磷酸甘油醛,再由3-磷酸甘油醛脱氢酶和NADH催化生成3-磷酸甘油酸、NAD和磷酸,340nm处的吸光度变化反映了PFP的活性的高低。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。

试剂组成和配制

提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体30mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃避光保存。临用前加5mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加5 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂四:液体0.5mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂五:液体0.5mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂六:液体5mL×1瓶,4℃避光保存。

酶液提取

1.组织:按照质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置冰上待测。

2.细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置冰上待测。

3.液体:直接检测。

测定操作

1.分光光度计预热30min,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2.1mL石英比色皿,依次加入580μL试剂一,100μL试剂二,100μL试剂三,10μL试剂四,10μL试剂五,100μL试剂六,100μL粗酶液,充分混匀,记录340nm10s的吸光值A1310s的吸光值A2,△A=A1-A2

计算公式

1)按照样本蛋白浓度计算

酶活单位定义:每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmolNADH定义为一个酶活力单位。

PFPnmol/min/mg prot=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr

2)按照样本质量计算

酶活单位定义:每克组织每分钟消耗1 nmolNADH定义为一个酶活力单位。

PFPnmol/min /g 鲜重)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.54×ΔA÷W

3)按照细胞数量计算

酶活单位定义:每104个细胞每分钟消耗1 nmolNADH定义为一个酶活力单位。

PFPnmol/min /104 cell= ΔA÷(ε×d)×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总) ÷T

=321.54×ΔA÷细胞数量

4)按照液体体积计算

酶活单位定义:每毫升液体每分钟消耗1 nmolNADH定义为一个酶活力单位。

PFPnmol/min /mL=ΔA÷(ε×d)×V反总÷V样÷T=321.54×ΔA

V反总:反应体系总体积,1mL;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.1mLV样总:加入提取液体积,1mLT:反应时间,5 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g

注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

标签:焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(Pyrophosphate: fructose-6  phosphate-1-phosphoric acid 

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