测定原理：

利用80％乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开，进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖，采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量，即可计算淀粉含量。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵、冰、浓硫酸（不允许快递）和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：液体100mL×1瓶，4℃保存；

试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；

淀粉提取：

1、称取0.1~0.2g新鲜样本（建议称取约0.1g新鲜样本）于研钵中研碎，加入1mL试剂一，充分匀浆后转移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀。

2、沉淀中加入0.5mL蒸馏水，放入95℃水浴中糊化15min（盖紧，以防止水分散失）。

3、冷却后，加入0.35mL试剂二，25℃提取15min，振荡3-5次。

4、加入0.85mL蒸馏水，混匀，3000g，25℃离心10min，取上清液待测。

注意：如样本为淀粉含量较高的干样，为保证充分提取，可适当减小取样量，如称取0.01g~0.02g干样，加入1mL试剂一，其余提取步骤同上。

测定操作表（在1.5mL EP管中依次加入下列试剂）：

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至620nm，蒸馏水调零。

2、调节水浴锅至95度。

3、工作液的配制：临用前在试剂三中加入7.5mL蒸馏水后，缓慢加入42.5mL浓硫酸，不断搅拌，充分溶解，待用；用不完的试剂4℃保存一周；

4、样本测定：取0.2mL样本和1mL工作液至EP管中，95度水浴10 min（盖紧，防止水分散失），自然冷却至室温，在620 nm 波长下记录测定吸光度值A。

淀粉含量计算：

标准条件下测定的回归方程为y = 5.872x - 0.0295；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。

1、按照蛋白浓度计算

淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷5.872 ÷(V1×Cpr)=0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2、按样本鲜重计算

淀粉含量(mg/g 鲜重)= [(A+0.0295)×V1] ÷5.872÷(W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W

V1：加入反应体系中样本体积，0.2mL；V2：加入提取液体积，1.7 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g

注意：由于工作液具有强腐蚀性，请谨慎操作。

若吸光值大于2，请将样本用提取液稀释后再测定，计算公式中乘以相应的稀释倍数。

提取液的配置：0.35mL试剂二+1.35mL水。用多少按照此比例配多少。

最低检测限为10μg/g鲜重或100ng/mgprot。