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生化检测试剂盒 > 分光检测试剂盒 > 可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase,SSS)试剂盒分光光度法50管/48样
产品名称:
可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase,SSS)试剂盒分光光度法50管/48样
型号:
CS-01S63374
生产地址
进口、国产
产品价格
电议
产品简介
可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase,SSS)试剂盒质量可靠、价格优惠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点。
产品详情

一、概述:

 公司上万种科研产品,主要供应各大科研单位和学校,是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关,确保每一个出厂产品质量合格,让您买的省心,用得放心。

产品名称

检测方法

规格

货号

可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase,SSS)试剂盒

分光光度法

50/48

CS-0163374

   注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:

SSSEC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。

商品介绍:

测定原理

SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPHNADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。

需自备的的仪器和用品

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制

提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:50mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入14mL试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入8mL试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入17mL试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

试剂五:液体×1支,-20℃保存;临用前加入1mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

试剂六:粉剂×1支,-20℃保存;临用前加入1mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

粗酶液制备

按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2、在EP管中按顺序加入下列试剂

混匀后立即340 nm波长下记录初始吸光度A1 2min后的吸光度A2,计算ΔA=A2-A1

注意:试剂二如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。

SSS活性计算

1、按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

SSSnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V) ÷T×稀释倍数

=529×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

2、按照样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

SSS活性(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样÷V样总×W)÷T×稀释倍数

=529×ΔA÷W

V 反总:反应体系总体积,7.8×10-4 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.15 mLV样总:加入提取液体积,1 mLT:反应时间,2 min;稀释倍数:1.9Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量。

注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

标签:可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase SSS)试剂盒 

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