产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)试剂盒 | 分光光光度法 | 50管/24样 | CS-01S63377 |
SBE(EC
测定原理
直链淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收,SBE使直链淀粉含量减少,从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自备的的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×2支,4℃保存;临用前每支加入1mL蒸馏水,95℃沸水浴充分溶解后备用;用不完的试剂4℃保存;
试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体5mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
注意:
1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5min 95℃水浴处理。
2、试剂二如有沉淀,务必沸水浴溶解后使用。
SBE活力单位的计算
1、按照蛋白浓度计算
单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性(U/mg prot)=( A对照管-A测定管)/A对照管÷Cpr ×100
2、按照样本鲜重计算
单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每g组织在反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性(U/g 鲜重)=(A对照管-A测定管)/A对照管÷(W÷V样总)×100
V样总:提取液总体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。
联系人:高小姐
手 机:13585831301
Q Q:3004967995
座 机:021-59541103
传 真:021-60443211
地 址:上海嘉定区嘉罗公路1661