活性污泥酸性蛋白酶（Solid -Acid Protease，S-ACPT）试剂盒分光光度法50管/24样CS-01Ｓ63462

一、概述：

公司上万种科研产品，主要供应各大科研单位和学校，是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关，确保每一个出厂产品质量合格，让您买的省心，用得放心。

产品名称	检测方法	规格	货号
活性污泥酸性蛋白酶（Solid -Acid Protease，S-ACPT）试剂盒	分光光度法	50管/24样	CS-01Ｓ63462

注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ACPT在酸性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

商品介绍：

测定原理：

酸性条件下，S-ACPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。

所需仪器及设备：

可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、蒸馏水

试剂组成和配置：

试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10ml蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；

试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入100uL试剂七使粉剂润湿，然后加入20ml试剂一，转入烧杯中沸水浴磁力搅拌溶解后待用；用不完的试剂4℃保存；（可在烧杯上盖一层保鲜膜，注意观察，避免水分全部蒸发，一般加热15-30分钟，该试剂为过饱和试剂，充分混匀后仍出现颗粒物不溶物不影响使用）。

试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入50ml蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；

试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存；

试剂六：液体1.5mL×1支，50μg/ml标准酪氨酸溶液，4℃保存；

试剂七：液体1.5mL×1支，4℃保存；

样品处理：

胞外酶：取1mL样本，8000g 25℃离心10min，取上清液测定。

胞内酶: 取1mL样本，8000g 25℃离心10min，弃上清，在沉淀中加入1mL蒸馏水，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3秒，间隔10秒，重复30次），8000g 25℃离心10min，取上清液测定。

测定操作：

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。

2、试剂二、三和四40℃水浴10min。

3、样本测定：

注意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。

S-ACPT活性计算：

（1）按样本体积计算

单位定义：每min每mL样本产生1μg酪氨酸为一个 S-ACPT活力单位。

S-ACPT(μg/min/mL)=C标准×(A测定管-A对照管)÷A标准管×V反总÷V样÷T=35×(A测定管-A对照管)÷A标准管

（2）按样本蛋白浓度计算

单位定义：每min每mg组织蛋白产生1μg酪氨酸为一个 S-ACPT活力单位。

S-ACPT(μg/min/ mg prot)=C标准×(A测定管-A对照管)÷A标准管×V反总÷V样÷T÷Cpr =35×(A测定管-A对照管)÷A标准管÷Cpr

C标准管：标准管浓度， 50μg/mL；V反总：反应体系总体积，0.42mL；T：反应时间，30min； V样：样本体积，0.02mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL。

注意：

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。