产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
土壤β-木糖苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)测定试剂盒 | 分光光度法 | 50管/24样 | CS-01S63454 |
β-木糖苷酶(EC
测定原理
S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰,测定405nm光吸收增加速率,可计算S-β-XYS活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体2mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
约0.1g鲜土或风干土样,加入1mL提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g,4℃,离心10min,取上清待测。
测定操作表:
1、分光光度计预热30min,调节波长至405nm。
2、操作表
β-木糖苷酶活性
标准曲线:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值ΔA。
酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V样总:加入提取液体积,1mL; V反总:反应总体积,0.6mL;V样:反应中样品体积,0.2mL; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;
ΔA控制在0.01-2范围内,若ΔA大于2,可适当减小样本量。
标准曲线线性范围为:0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。
联系人:高小姐
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