产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
土壤亮氨酸氨基肽酶(Solid-Leucine Aminopeptidase,S- LAP)试剂盒 | 分光光度法 | 50管/24样 | CS-01S63486 |
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
测定原理:
S-LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体65mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;
S-LAP测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至405nm,蒸馏水调零。
2、在试剂二瓶中加入30mL试剂一充分溶解(如较难溶解,可60℃水浴加热约30min促进溶解);用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3、操作表
S-LAP活力单位的计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义:每天每g土样每天生成1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP(μmol/d /g 土样)=ΔA×V反总÷(ε×d)×106÷W÷T=14.8×ΔA
V反总:反应体系总体积,1.2×10-3 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;T:反应时间,1h=1/24d; W:样本质量,0.2g。
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